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細胞鐵離子試劑盒的檢測范圍
更新時間:2023-03-31   點擊次數(shù):670次

細胞鐵離子試劑盒檢測方法

 

描述:鐵是人體必需的元素之一,對人體的新陳代謝和身體健康具有重要作用,血液中鐵的含量不足,就會造成缺鐵性貧血。鐵存在于人體所有的細胞內(nèi),各組織、器官包括各內(nèi)分泌腺都含有鐵。肝臟、脾臟和肺組織內(nèi)含量較為豐富。成人體內(nèi)含鐵 3~5 克,大部分都以蛋白質(zhì)復合物形式存在,少部分以離子的形態(tài)存在。本試劑盒采用亞鐵嗪比色法可以定量細胞鐵離子,線性范圍 5~300uM。產(chǎn)品包括標準品和空白對照,本試劑盒可進行 100 個樣品

的檢測。


鐵離子比色法檢測試劑盒-20221019.jpg

 

原理:

鐵與蛋白結(jié)合成復合物,在酸性介質(zhì)中鐵從復合物中解離出來,再被還原劑還原成二價鐵,并與亞鐵嗪生成紫紅色化合物,在 540-580nm 處可比色測定。

 

適用范圍:該試劑盒可用于培養(yǎng)細胞中鐵離子定量檢測。

用戶自備:4.5%KM溶液 5ml。

 

操作步驟:

1. 樣品準備(以 24 孔板為例):將含鐵元素 DMEM 培養(yǎng)過的細胞用冷的 PBS 2ml 洗兩遍,將 PBS 吸棄(若不馬上檢測可將其凍存于-20℃)。200ul/孔裂解液裂解細胞,置于搖床裂解 2h。

2. 標準品的稀釋:用試劑盒提供的稀釋用液將 3mM 的標準品母液稀釋為:300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀釋并設置 0 濃度對照反應管。

3. 將緩沖液與 4.5%高KM溶液按 1:1 混勻,稱為混液 A。

4. 參考下表使用 1.5ml 離心管,設置空白對照管、標準品管和樣品管。如果樣品中的鐵元素含量過高,用裂解液適當稀釋后再進行測定。

 

說明:

1. 本試劑盒不受錳離子、鎂離子、鎳離子和鋅離子等的干擾。

2. 操作過程中,樣品與試劑等避免與鐵器接觸,以防污染。

3. 所測樣本的值高于標準曲線的上限,應稀釋樣品后重新測定。

4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作,檢測試劑有腐蝕性,請小心操

作,若不慎沾到皮膚上請馬上用清水沖洗干凈。

5. 該試劑盒僅供科學研究使用

 

 


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