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Western blotting 蛋白Marker產(chǎn)品簡介!
更新時間:2019-09-05   點擊次數(shù):3271次

Western blotting 蛋白Marker產(chǎn)品簡介!

 

Western Blot Marker是專門為Western Blot試驗設計的分子量標準。傳統(tǒng)的Western Blot試驗需要使用預染蛋白Marker來跟蹤檢測陽性抗原信號和轉(zhuǎn)膜效率。

但預染蛋白Marker用在Western Blot試驗中有三大缺點:

(1)預染蛋白Marker無法在膠片上曝光,曝光信號需要根據(jù)膜上的預染蛋白Marker來判斷,因此后續(xù)的圖片需要拼接才能兩者合而為一;

(2)預染蛋白Marker都經(jīng)過化學修飾,經(jīng)過化學修飾的蛋白在SDS-PAGE電泳過程中遷移率發(fā)生改變,分子量信息不再準確,往往導致Western Blot結(jié)果判斷出現(xiàn)較大偏差;

(3)預染蛋白Marker無法檢測作為雜交過程的陽性對照。Western Blot Marker由7種不同分子量的蛋白組成(19、20、35、45、60、65、110 KDa),其中19 、45 、65KDa條帶為藍色預染marker,其它四個條帶都可與人、小鼠、大鼠、山羊、綿羊、兔的IgG恒定區(qū)結(jié)合。

 

Western Blot Marker可以直接結(jié)合二抗,或通過結(jié)合一抗間接結(jié)合二抗,因此蛋白Marker就能與抗原在同一張膠片上曝出信號,陽性信號可以直接通過Western Blot Marker的位置來判斷。另外,預染發(fā)光Western BlotMarker 還可作為Western Blot 試驗的陽性對照。

 

使用說明:
1. 取出后于室溫放置融化;
2. 溫和地充分混勻,取 5μl 該 Western Blot Marker 樣孔中,進行 SDS-PAGE 電泳。
3. 電泳完畢后轉(zhuǎn)至 PVDF 膜或 NC 膜,與一抗二抗孵育。
4. 孵育完畢,將 Western Blot Marker 與抗原一起通過 ECL 曝光至膠片。

 

Western blotting 蛋白Marker注意事項 :
1. 本產(chǎn)品可直接使用,不需要加熱。
2. 及時更換電泳緩沖液并使用新配制的凝膠,以免影響電泳結(jié)果。
3.  該產(chǎn)品與抗血清或高濃度多克隆抗體一起孵育時可能會出現(xiàn)非特異性條帶,此時可降低該預染發(fā)光WesternBlot Marker 的上樣量至1~2µl。

 

Western blotting 蛋白Marker產(chǎn)品簡介!

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