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AAF固定液使用說(shuō)明
更新時(shí)間:2019-05-13   點(diǎn)擊次數(shù):2863次

    固定的目的在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對(duì)自身組織和細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。固定劑通過(guò)凝固、生成添加化合物等使蛋白質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而使酶失活。固定劑對(duì)細(xì)胞核細(xì)胞外成分發(fā)生物理改變。未固定前活細(xì)胞被包裹在不能穿透的膜內(nèi),固定劑能夠破壞這一屏障,使大分子物質(zhì)穿透膜、逸出。
   選擇固定液對(duì)組織染色和免疫組化染色都極其重要,通常將幾種固定劑混合配制成復(fù)合固定液,這樣可以適應(yīng)多種組織、細(xì)胞成分的保存,然而目前還沒(méi)有一種標(biāo)準(zhǔn)的固定液適用于的組織、細(xì)胞成分的保存。固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦尉酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。
  AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液或FAA固定液,主要由乙醇(A)、乙酸(A)、甲醛(F)組成,兼有脫水作用。

產(chǎn)品組成:
  名稱AAF固定液
  規(guī)格:500ml
  儲(chǔ)存條件:RT避光 6個(gè)月
  用途:也叫FAA/AFA固定液,組織化學(xué)中細(xì)胞或組織切片的固定。
  注意事項(xiàng):主要由乙醇、冰乙酸、甲醛等組成。常用于快速脫水和固定以及冷凍切片的快速固定??勺鳛榻M織材料的保存劑。

 操作步驟(僅供參考):
1、 按實(shí)驗(yàn)具體要求操作。
2、 取新鮮組織入AAF固定液,置于冰箱內(nèi)低溫固定10~30min。
3、 常規(guī)石蠟切片因固定不佳導(dǎo)致染色效果不滿意時(shí),可在染色前再用AAF固定液固定5min,染色效果會(huì)有明顯提高。
注意事項(xiàng):
1、 AAF固定液對(duì)人體有一定的損害,請(qǐng)?jiān)谕L(fēng)好的環(huán)境下小心操作,避免吸入。
2、 固定液pH接近用中性,pH范圍6~8。
3、 組織取材的厚度不同,固定時(shí)間也不同,對(duì)組織恰當(dāng)?shù)倪x材有利于固定液的滲透。常規(guī) 活檢組織比較適合的厚度為2~4mm,一般不超過(guò)6mm。
4、 固定液的容量應(yīng)足夠,一般固定液與組織塊的體積比率應(yīng)大于10:1。如果容積不夠大,可以在固定期間更換1~3次固定液。
5、 溫度對(duì)固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但溫度不宜過(guò)高。
6、 取出新鮮組織后,應(yīng)及時(shí)固定,無(wú)法及時(shí)固定時(shí),應(yīng)保存于生理鹽水中及時(shí)送檢。
7、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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