人促甲狀腺激素FSH放免檢測(cè)簡(jiǎn)直太棒了！
實(shí)驗(yàn)原理：
促甲狀腺激素（TSH）是含 211 個(gè)氨基酸的糖蛋白類激素，分子量約為 28,000D，由α 和β兩個(gè)亞基組成。TSH 主要受下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素（TRH）和血液中游離 的甲狀腺激素（T3、T4）的調(diào)節(jié)。TRH 可促進(jìn) TSH 的分泌，T3、T4對(duì) TSH 的分泌起負(fù)反饋 調(diào)節(jié)作用。另外，下丘腦分泌的（SS）和腎上腺皮質(zhì)分泌的糖皮質(zhì) 激素可降低 TSH 的分泌，而雌激素可增加其分泌。 本品采用了第二抗體＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理：含促甲狀腺激素(TSH)的樣 品和 125I 標(biāo)記的促甲狀腺激素(TSH)與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二 抗及 PEG，使免疫復(fù)合物沉淀，離心，測(cè)沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中促甲 狀腺激素(TSH)的濃度。
樣本要求：
110 微升人血清樣本。 采靜脈血 5ml 于塑料試管中，靜置使其凝固后，1500 轉(zhuǎn)／分離心，取其上清液，放置玻 璃瓶中。如果樣本不立即使用，可在-18℃~-25℃儲(chǔ)存 6 個(gè)月。 嚴(yán)重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響。
操作方法：
1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫，平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作； 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào)，實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù)； 3、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 200µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中； 4、 除 T、NSB 管外，每管均各加入 200µl 抗體工作液，充分混勻； 5、 37℃溫育 1.5 小時(shí)； 6、 每管均各加入 200µl 標(biāo)記物工作液，充分混勻； 7、 37℃溫育 1 小時(shí)； 8、 每管均各加入 500µl 分離劑后，充分混勻； 9、 離心 3500 轉(zhuǎn)／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液； 10、 用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定每管 1 分鐘的放射性強(qiáng)度計(jì)數(shù)； 11、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要注意：
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意] 1、 γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分，效率應(yīng)≥75％； 2、 加入放射性標(biāo)記物時(shí)，應(yīng)防護(hù)、小心謹(jǐn)慎，以避免造成放射性污染； 3、 如果某一個(gè)樣本的測(cè)定值高于gao濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1：2 或 1： 4 的比例稀釋樣本后重新測(cè)試，測(cè)試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
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