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硫酸葡聚糖(仿肝素)親和填料的特點和技術(shù)指標
更新時間:2025-05-20   點擊次數(shù):588次

硫酸葡聚糖(仿肝素)親和填料的特點和技術(shù)指標


產(chǎn)品介紹

NuPerley DexS-HbP 和 NuPerley DexS-VirS 是將硫酸葡聚糖(Dextran Sulfate)鍵合在新一代高剛性瓊脂糖微球 NuPerley 上形成的一種親和層析分離介質(zhì)。硫酸葡聚糖又稱右旋糖酐硫酸酯,是天然多糖右旋糖酐的合成衍生物,具有與肝素類似的的生物活性,

是一種非動物源的仿肝素配基,填料產(chǎn)品被稱為仿肝素親和填料。NuPerley DexS-HbP 的含硫量相對低(40~80 μmol/mL),可用于蛋白的親和分離、純化,例如血漿蛋白。同時,硫酸酯是一種耐鹽型陽離子交換配基,NuPerley DexSHbP 也可作為陽離子交換填料,對溶菌酶的結(jié)合量大于 60 mg/mL,且在 50~150 mM NaCl鹽濃度下仍結(jié)合良好。NuPerley DexS-VirS 的含硫量相對高(70~130 μmol/mL),主要用于病毒和病毒樣顆粒(VLP)的捕獲與純化。


硫酸葡聚糖(仿肝素)親和填料的特點和技術(shù)指標

硫酸葡聚糖(仿肝素)親和填料的特點和技術(shù)指標

使用方法參考

 色譜柱裝填

以下闡述與層析系統(tǒng)連接時,填料的色譜柱裝填方法。

(1)需要用到的材料的溫度要與色譜操作的溫度一樣,液體好做脫氣處理。裝柱液一般為純水,也可含 10~100 mM NaCl。

(2)填料用量計算:通過沉降定量填料體積,需要的沉降填料體積=柱體積×壓縮比(也稱壓縮因子)。沉降體積是指填料在 20%乙醇保存液中自然沉降讀取的穩(wěn)定體積。NuPerley DexS-HbP 和 NuPerley DexS-VirS 的壓縮比為~1.10。為使達到裝柱比,

可通過柱頭下壓的方法,也可以通過高流速壓柱。

(3)填料清洗:將填料懸液充分搖勻后量取相應(yīng)體積,抽濾除去液體,并用約 3 倍填料體積的純化水洗滌,重復 3 次,以除去保存液。

(4)裝柱填料懸液準備:將填料轉(zhuǎn)移到適當?shù)娜萜髦?,加入適量的裝柱液,制成50~75 v%的裝柱填料懸液,使用前攪勻。

(5)裝填前準備:在清洗干凈的層析柱下端加入裝柱液,以除去下墊片及層析柱下端的空氣,在柱內(nèi)保留少量的純水,擰緊下堵頭,調(diào)整柱子使其垂直于地面。

(6)裝填:將攪勻后的填料懸液一次性緩慢倒入層析柱內(nèi)(必要時使用裝柱器),為避免引入氣泡,應(yīng)使之沿層析柱內(nèi)壁自然流下。將填料加入后,用裝柱液將裝柱器加滿,擰緊裝柱器上蓋,將柱子與層析系統(tǒng)連接。

(7)壓柱:使柱內(nèi)填料自然沉降(或 50~150 cm/h 的低流速下沉降),待填料沉降后(填料與液體的界面清晰),去除裝柱器,裝上上柱頭,并將柱頭下降至界面處;通過高流速(推薦流速見下表,注意柱壓不超過 0.3 MPa),繼續(xù)壓柱至界面清晰穩(wěn)定,

標記界面穩(wěn)定時的柱高。停泵,打開柱頭上的閥門/堵頭,關(guān)閉柱底的閥門/堵頭,下壓柱頭至標記位置下方與壓縮比對應(yīng)的位置,旋緊柱頭,裝柱完成。裝柱完成后,需用高流速平衡柱內(nèi)的填料。



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