Swe重組胰酶細(xì)胞消化液使用方法產(chǎn)品描述
胰蛋白酶（Trypsin）簡稱胰酶，是一種絲氨酸水解酶，能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸中的羧基端切斷。在組織細(xì)胞的提取、培養(yǎng)，以及體外細(xì)胞培養(yǎng)過程中，均會使用到胰蛋白酶消化液，用于水解細(xì)胞間蛋白質(zhì)，使組織或細(xì)胞離散成單個細(xì)胞。傳統(tǒng)胰蛋白酶取自豬、牛等動物胰臟。傳統(tǒng)胰酶的來源和生產(chǎn)工藝特性，決定了其不可避免的會含有動物源雜質(zhì)以及潛在病毒污染。本產(chǎn)品使用重組豬胰蛋白酶替代傳統(tǒng)胰蛋白酶。在生產(chǎn)制備過程中不使用任何動物源性原料，且通過多輪純化，確保重組豬胰蛋白酶純度以及活率。使其不僅可以替代傳統(tǒng)胰酶的功能，而且可用于嚴(yán)格要求使用無動物源性的特殊細(xì)胞或組織的消化。此外本產(chǎn)品含EDTA和酚紅指示劑。
儲存與運輸
冰袋運輸；4℃避光保存，12個月有效；短期不使用情況下，建議-20℃保存，可保存更長時間。
操作步驟
注意：以下方案主要用于貼壁細(xì)胞。對于組織消化，需要先將組織剪碎成合適大小。不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
1. 去除細(xì)胞原培養(yǎng)液，使用PBS、不含血清培養(yǎng)液或其他緩沖液洗滌細(xì)胞1-2次以去除殘余血清；
2. 加入適量重組胰蛋白酶消化液覆蓋細(xì)胞，于顯微鏡下進(jìn)行消化觀察，大多數(shù)細(xì)胞消化時間在30s-3min之間；對于難消化細(xì)胞，可放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育消化一定時間（ 消化時間僅供參考，具體消化時間需根據(jù)實際情況而定）；
3. 當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)明顯收縮或形態(tài)變化時，吸除重組胰蛋白酶消化液，加入適量含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液終止消化（如果用移液槍輕輕吹打時很難使細(xì)胞從板底脫落，表明消化時間不夠，可加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。切忌避免過度消化）；
4. 細(xì)胞懸液收集置離心管，以800-1200 rpm/min 離心3-5 min，加入適量含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液（可選）；
5. 輕輕吹打細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，即可傳代培養(yǎng)或后續(xù)實驗。
在線咨詢